方法一：

1.將冰凍的血在室溫下溶化；
2.取1ml血液轉(zhuǎn)入一無菌的2ml離心管中，加入等體積的PBS磷酸鹽緩沖液，充分混勻后12000rpm離心5min，棄上清；
3.加入667μl STE，24μl的20%的SDS，37℃水浴1h；
4.加10μl的20mg/ml的蛋白酶K混勻，55℃水浴消化過夜（10～14h）；
5.將消化的樣品加入等體積的Tris飽和酚，充分搖勻，12000rpm離心10min；
6.將上層水相轉(zhuǎn)入另一無菌2ml離心管中；再加入等體積的Tris飽和酚，充分搖勻，12000rpm離心10min；
7.將上層水相轉(zhuǎn)入另一無菌2ml離心管中；并加入等體積的酚∶氯仿∶異戊醇（25∶24∶1），旋渦振蕩至充分混勻，12000rpm離心10min；
8.將上層水相轉(zhuǎn)入另一無菌2ml離心管中；并加入等體積的氯仿∶異戊醇（24∶1），充分振蕩混勻，12000rpm離心10min；
9.將上清液轉(zhuǎn)移到另一無菌2ml離心管中；加入2倍體積的冰乙醇，1/10體積醋酸鈉水平搖動，直到可見絮狀DNA析出；
10.將樣品置-20℃冰箱冷凍30min或冰浴15～20min，取出后再次12000rpm離心10min，使DNA沉淀；
11.用槍頭將DNA挑到另一無菌離心管中，用適量的70%乙醇洗滌并晃動，以洗出DNA的雜質(zhì)；
12. 倒出乙醇，將DNA用真空干燥或自然晾干，加入適量的TE緩沖液回溶，-20℃保存?zhèn)溆谩?/span>

方法二：

蛋白酶K法

取抗凝血樣500μL，加入等體積的蒸餾水溶解紅細胞，于12000 r/min離心15 min，棄上清。在上管中加500μL 蒸餾水，12000 r/min離心15m in，棄上清.在沉淀中加入500μL裂解液1 mo l/LTris-HCl pH 7. 5、0. 5 mo l/L EDTA pH7. 5、0. 5 %SDS、1μL RNase、2μL蛋白酶K，55℃消化過夜。用500μL酚-氯仿-異戊醇(25∶24∶1) 抽提，10000 r/min離心10min，將上清轉(zhuǎn)移入另一潔凈的管子，重復上述操作1次。加2倍體積無水乙醇顛倒混勻數(shù)次至DNA絮狀析出，用75 %的乙醇沉淀DNA抽干，50μL TE溶解DNA，4℃保存?zhèn)溆谩?/span>

方法三：

氯仿-異戊醇法

取抗凝血500μL 置于1.5 mL Eppendorf管中，加細胞裂解緩沖液1mL (0.32 mo l/L 蔗糖； 1% Triton X-100；0.005 mmol/L MgC_l2·6H₂O；0.012 mo l/LTris-HCl pH7. 5)，混合，12000 r/m in離心5min，棄上清。重復上述裂解1次。于沉淀物中加入500μL滅菌蒸溜水溶解紅細胞，12000 r/m in離心10 min棄上清，用80μL DNA稀釋緩沖液(0.375mo l/L N aCl；0.12 mo l/L EDTA ) 將沉淀輕輕重懸，加入15μL 20 % SDS，100μL 5 mo l/LN aCl，充分混勻30s，再加入240μL無菌雙蒸水、350μL 氯仿-異戊醇(24∶1 體積) 混合液充分混勻30s，12000 r/min 離心3min。將上清轉(zhuǎn)至另支Eppendorf 管中，加860 LL 無水乙醇顛倒混勻數(shù)次至DNA 絮狀析出，12 000 r/m in 離心3 min，棄上清，37℃干燥. 50μL TE 溶解DNA，備用。

方法四：

碘化鉀法

于350μL 抗凝全血中加無菌雙蒸水900μL 溶解，10000 r/min 離心5m in 棄上清，重復上述試驗1次，將沉淀物混勻。加70μL 5 mol/L KI，旋渦振蕩30s，加0. 9 % NaCl 300μL，氯仿-異戊醇(24∶1) 450μL，充分振蕩1min，12 000 r/m in 離心5m in，吸取水相層于另支Eppendorf 管中，加異丙醇180μL，充分混勻，12000 r/m in 離心5 m in 棄凈上清，加無水乙醇1mL，12000 r/min 離心5min，棄凈乙醇，待干，以50μL TE 溶解DNA備用.