一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

檢測Simgen 病毒RNA純化試劑盒分離純化病毒RNA的效果。

二、實(shí)驗(yàn)步驟：

1.使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA（具體實(shí)驗(yàn)步驟詳見說明書），將提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增。

2.使用傳統(tǒng)Trizol法從HCV血清中提取RNA，將提取的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄及PCR擴(kuò)增。

三、實(shí)驗(yàn)樣本：

100μl，5×10⁵ copies/ml的HCV血清。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：

曲線1：用Simgen病毒RNA純化試劑盒從100 μl，5×10⁵ copies/ml的HCV血清中提取的RNA作為模板檢測HCV所獲得的擴(kuò)增曲線（RT-PCR一步法，50 μl擴(kuò)增體系中加入25 μl純化的RNA）
曲線2：用傳統(tǒng)的Trizol法（添加糖原助沉）從100 μl同一5×10⁵ copies/ml的HCV血清中提取的RNA作為模板檢測HCV所獲得的擴(kuò)增曲線（RT-PCR一步法，50 μl擴(kuò)增體系中加入全部純化的RNA）

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論：

1.根據(jù)上圖可知，使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后成功擴(kuò)增出曲線，證明病毒總RNA試劑盒提取的RNA能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。

2.根據(jù)上圖可知，使用Simgen 病毒RNA純化試劑盒從HCV血清中提取RNA，經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后擴(kuò)增的曲線，較使用傳統(tǒng)Trizol法，PCR靈敏度更高。