1. 0.2-0.5g糞便置于Ep管中(冰水浴),加入1mlPBS,漩渦振蕩混勻,200xg離心5min,取上清,冰水??;
2. 向沉淀中加入1mlPBS,重復步驟1;
3. 混合兩次上清,用300g離心5min,棄沉淀;
4. 兩次上清用10000rpm離心8min,沉淀菌體;
5. 所得沉淀用1mlPBS洗滌至上清無色;
6. 20℃過夜;
7. 向Ep管中加入500ulDNA提取液,6ul蛋白酶K,37℃搖床160rpm搖40min,再加入56ul20%SDS,65℃條件下水浴2h,每隔15-20min輕搖Ep管;
8. 等體積酚/氯仿抽提,8000rpm離心10min,取上層水相,重復兩次,除凈蛋白;
9. 0.6倍體積異丙醇沉淀DNA,12000rpm離心10min(4℃);
10. 用70%乙醇洗滌DNA沉淀兩次,自然干燥;
11. 沉淀中加入15ulTE,在37℃孵育箱中孵育30min。