夏日炎炎，酷熱的天氣使人心情煩躁，這個時候再來個操作繁瑣復(fù)雜的實驗豈不是火上澆油。每到這種熱得都不想動一下的時候，肯定有同學(xué)會想要是能“唰的一下”DNA就提好了那該多好啊。今天小新就為大家?guī)硪豢羁焖傺?/span>DNA提取試劑盒，與市場上常見的半小時操作時間起步的試劑盒不同，它的血液DNA提取時間縮短到了8分鐘，打破了原來一直由新景生物保留的15分鐘內(nèi)提取血液DNA（全血DNA小量試劑盒，Cat. No. 3003050）的記錄。更令人驚嘆的是：在8分鐘內(nèi)提取的還是600 μl血液中的DNA?。?！要知道像QIAGEN、天根等公司的血液DNA提取試劑盒，半小時提取的僅僅是200 μl血液中的DNA……接下來就讓我們看下這個產(chǎn)品具體是怎么做到的，以及提取效果如何。

一、實驗材料

人全血(EDTA抗凝)、快速全血DNA小量試劑盒（Simgen Cat.No.3003050）、2×PCR Mix（Simgen Cat.No.7003100）、1.3 kb β-球蛋白引物（F：TTAGGCCTTAGCGGGCTTAGAC/R：CCAGGATTTTTGATGGGACACG）

旋渦振蕩器（越新儀器，XH-C）

臺式離心機(jī)（eppendorf centrifuge 5415 D）

超微量分光光度計（Simgen Cat.No.sim100）

電泳儀（北京六一儀器廠，DYY-6C型）

PCR儀（Techne FPROG5Y Progene Thermal）

二、實驗步驟

（一）DNA提取

1. 在1.5 ml離心管中加入600 μl Buffer L7，再加入600 μl的全血(EDTA 抗凝)，立即用力混合3~5次，使血樣生成褐色沉淀物，再旋渦振蕩30秒混合均勻，使沉淀物徹底分散開來。

2. 13200 rpm離心1分鐘。

3. 將步驟2中的上清液全部倒入到核酸純化柱（核酸純化柱置于2 ml離心管中）中，蓋上管蓋，12000 rpm離心30秒。

4. 棄2 ml離心管中的濾液，將核酸純化柱置回到2 ml離心管中，在核酸純化柱中加入800 μl Buffer WB，蓋上管蓋，12000 rpm離心30秒。

5. 棄2 ml離心管中的濾液，將核酸純化柱置回到2 ml離心管中，13200 rpm離心1分鐘。

6. 棄2 ml離心管，將核酸純化柱置于一個潔凈的1.5 ml離心管中，在純化柱中加入100 μl Buffer TE，蓋上管蓋，室溫靜置1分鐘，12000 rpm離心30秒得到全血DNA。

（二）PCR擴(kuò)增

PCR擴(kuò)增體系：

擴(kuò)增程序：

94℃,5 min，{94℃,45 sec；55℃,45 sec；72℃,1 min 30 sec}×30 cycles，72℃,10 min。

三、實驗結(jié)果

1. 在超微量分光光度計上用Buffer TE調(diào)零，測量提取的DNA，結(jié)果如下：

2. 在1%的瓊脂糖凝膠上加入5 μl提取的DNA/擴(kuò)增產(chǎn)物進(jìn)行電泳，結(jié)果如下：

四、分析與討論

1. 從操作步驟可以計算出實際標(biāo)明的時間總共是5分鐘，加上步驟銜接過程需要損耗的3分鐘，8分鐘完成血液DNA提取貨真價實，確實沒有夸張成分。好奇心強(qiáng)的小伙伴還可以掃描二維碼觀看真實的操作視頻：

2. 從濃度測量結(jié)果和圖1電泳結(jié)果可知，用快速全血DNA小量試劑盒提取到的全血DNA純度好，濃度高，條帶清晰完整，無降解現(xiàn)象。

3. 由圖2可知，在40 μl擴(kuò)增體系中用18 μl提取的DNA（過量模板測試）作為模板進(jìn)行擴(kuò)增，擴(kuò)增結(jié)果與陽性對照一致，并無觀察到明顯的抑制效果，進(jìn)一步說明用快速全血DNA小量試劑盒提取到的全血DNA純度好，抑制物少，完全能滿足后續(xù)實驗需求。

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