自從上次“實測快速通用型基因組DNA提取試劑盒的性能”文章發(fā)布后，已經(jīng)有很多客戶向我們申請了試用裝，使用的反饋效果也不錯。其中某生物科技有限公司更是做了多家試劑盒的測試對比，接下來小新就將該公司測試的結(jié)果分享給大家，畢竟產(chǎn)品自測的效果難免讓人懷疑有做廣告的嫌疑，第三方的測試才會顯得公平公正。

一、 實驗材料

試劑盒：**贊（DC112-01）、**金（EE101-01）、*根（KG203）、新景（3105005）、*為（CW2298M）

樣本：小鼠肌肉、豬血、大腸桿菌（DH5α）、夾竹桃葉片

二、 實驗方法

1. 樣本處理：

A. 小鼠肌肉：稱取20 mg，液氮研磨成粉；

B. 豬血：取200 μl全血；

C. 大腸桿菌（DH5α）：1.5 ml菌液離心取細(xì)菌沉淀；

D. 夾竹桃葉片：稱取100 mg，液氮研磨成粉。

2. 按照各試劑盒說明書操作，提取DNA。

3. 用超微量分光光度計測量提取的DNA，并進(jìn)行電泳檢測和Qubit檢測。

三、 實驗結(jié)果

1. 超微量分光光度計測量結(jié)果如下：

2. 電泳檢測結(jié)果如下：

3.Qubit檢測結(jié)果如下：

四、 分析與討論

1. 從超微量分光光度計測量結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是**贊，豬血樣本提取效果最好的是**贊，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。

2. 從電泳結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是新景，豬血樣本提取效果最好的是**贊和新景，大腸桿菌樣本提取效果最好的是**贊，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。（*根試劑盒提取的樣本電泳均未顯示條帶，但濃度高的原因是該試劑盒為快速樣品制備試劑盒，樣本裂解處理后DNA已經(jīng)降解成小片段，雖然可以直接用作qPCR檢測，但電泳已經(jīng)觀察不到DNA條帶。）

3. 從Qubit檢測結(jié)果看，小鼠肌肉樣本提取效果最好的是**贊，豬血樣本提取效果最好的是新景，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，夾竹桃葉片樣本提取效果最好的是新景。

4. 三種檢測結(jié)果的差異性說明了分光光度計檢測方法的局限性，因為紫外吸光度測量不具有選擇性，無法區(qū)分DNA、RNA或蛋白質(zhì)，同時一些游離核苷酸或多余的鹽離子也會影響檢測的數(shù)值。比如雖然從超微量分光光度計測量結(jié)果分析，大腸桿菌樣本提取效果最好的是*為，但是電泳的結(jié)果卻是新景和*為的DNA條帶亮度差不多，**贊的DNA條帶反而更亮，并且*為提取的大腸桿菌DNA中污染有RNA。

5. 對比超微量分光光度計測量結(jié)果和Qubit檢測結(jié)果，可以發(fā)現(xiàn)新景和**金的試劑盒提取的DNA這兩者的檢測結(jié)果數(shù)值都很接近，差異比**贊和*為的試劑盒要小，說明新景和**金的試劑盒提取的DNA純度更高，RNA等雜質(zhì)的含量很少（電泳也能觀察到區(qū)別）。

市場上常見的通用性基因組DNA提取試劑盒（包括**贊、*為等公司）所采用的技術(shù)方案都是模仿QIAGEN的DNeasy Blood & Tissue Kit 產(chǎn)品，簡而言之就是蛋白酶K消化后加醇過柱，缺點是去除雜質(zhì)效率比較差，且容易殘留RNA。新景的快速通用型基因組DNA提取試劑盒則采用了全新獨創(chuàng)的分相后直接過柱技術(shù)，不僅操作步驟更簡單，獲得的DNA純度更高，對復(fù)雜樣本（血液、植物、糞便）也能輕松應(yīng)對，必定會在不同廠家的通用型基因組DNA提取試劑盒競爭中脫穎而出。