回收不到DNA或者DNA的回收效率低
可能的原因:
1、樣本保存不當,導致樣本中的DNA降解。比如在2~8 ℃冰箱放置超過兩個星期的全血樣本即開始出現(xiàn)溶血現(xiàn)象,如果需要繼續(xù)使用血樣,則應轉(zhuǎn)移到-20 ℃或-70 ℃凍存。否則獲得的DNA將開始出現(xiàn)凋亡細胞的DNA帶型,并且此時全血中的DNA隨著時間的延長會持續(xù)分解,直至分離不到電泳可見的DNA。對于含水量高的組織樣本均應貯存于-20 ℃,推薦貯存于-70 ℃。
2、使用了過多的起始樣本,過柱時堵塞純化柱,影響洗脫效率;使用了過少的起始樣本。請根據(jù)第3頁“起始樣本”內(nèi)容決定起始樣本的用量。
3、 Buffer WA或Buffer WB中未加入無水乙醇。應按比例補加無水乙醇,如果是錯誤地加入了其他試劑,請向我公司技術(shù)部尋求幫助。
4、錯誤地使用了Buffer WA和Buffer WB的洗滌順序。確保按正確的順序洗滌純化柱。
DNA的洗脫效率差。參考第3頁柱純化技術(shù)中的第4點“洗脫DNA“內(nèi)容,優(yōu)化DNA的洗脫方案。