方法一：

1.取兩片幼嫩新鮮葉片，置于預(yù)冷的研缽中，倒入適量液氮，迅速研磨成粉末狀，隨后加入3ml預(yù)熱的2%CTAB抽提緩沖液和50ul抗氧化劑2-巰基乙醇，繼續(xù)研磨成略有流動性的糊狀或粥狀，轉(zhuǎn)入1.5ml的離心管中，于65℃水浴鍋中保溫約60min。

2.待混合物冷卻至室溫后加入等600ul的CI（氯仿：異戊醇=24：1）溶液混勻，輕輕顛倒離心管幾次使管內(nèi)混合物成乳濁液，常溫下10000rpm離心10min,取上清液轉(zhuǎn)入另一干凈的離心管中。 

3.重復(fù)步驟（2）一次。

4.取步驟（3）上清液加入2.5倍體積無水乙醇，仔細混勻，-20冰箱30min以上，沉淀DNA  4℃，12000rpm離心10min。

5.棄去上層有機溶劑，加500ul75%乙醇洗滌沉淀，4℃下8000rpm離心5min,棄去上清，洗滌沉淀3次。 

6.倒置或者37度培養(yǎng)箱烘干。 

7.加50ulTE緩沖液溶解DNA，于-20℃冷藏備用。

方法二：

1. 在50ml離心管中加入20ml提取緩沖液Ⅰ, 60℃水浴預(yù)熱。

2. 植物5-10g, 剪碎, 在研缽中加液氮磨成粉狀后立即倒入預(yù)熱的離心管中, 劇烈搖動混勻, 60℃水浴保溫30-60分鐘(時間長,DNA產(chǎn)量高), 不時搖動。

3. 加入20ml氯仿/戊醇/乙醇溶液, 顛倒混勻(需帶手套, 防止損傷皮膚)，室溫下靜置5-10分鐘, 使水相和有機相分層(必要時可重新混勻)。

4. 室溫下5000rpm離心5分鐘。

5. 仔細移取上清液至另一50ml離心管,加入1倍體積異丙醇,混勻,室溫下放置片刻即出現(xiàn)絮狀DNA沉淀。

6. 在1.5mleppendorf中加入1ml TE。用鉤狀玻璃棒撈出DNA絮團,在干凈吸水紙上吸干,轉(zhuǎn)入含TE的離心管中,DNA很快溶解于TE。

7. 如DNA不形成絮狀沉淀,則可用5000rpm離心5分鐘, 再將沉淀移入TE管中。這樣收集的沉淀,往往難溶解于TE,可在60℃水浴放置15分鐘以上，以幫助溶解。

8. 將DNA溶液3000rpm離心5分鐘,上清液倒入干凈的5ml離心管。

9. 加入5μlRNaseA(10μg/μl), 37℃ 10分鐘, 除去RNA(RNA對DNA的操作、分析一般無影響，可省略該步驟）。

10. 加入1/10體積的3mol/L NaAc及2×體積的冰乙醇,混勻,-20℃放置20分鐘左右,DNA形成絮狀沉淀。

11. 用玻棒撈出DNA沉淀,70%乙醇漂洗,再在干凈吸水紙上吸干。

12. 將DNA重溶解于1ml TE, -20貯存。

13. 取2μlDNA樣品在0.7% Agarose膠上電泳, 檢測DNA的分子大小。同時取15μl稀釋20倍, 測定OD260/OD280, 檢測DNA含量及質(zhì)量。

方法三：

植物DNA的SDS提取法：
試驗試劑：
1、研磨緩沖液：稱取59.63gNaCl，13.25g檸檬酸三鈉，37.2gEDTA－Na分別溶解后合并為一，用0.2mol/L的NaOH調(diào)至pH7.0，并定容至1000ml。
2、10×SSC溶液：稱取87.66gNaCl和44.12g檸檬酸三鈉，分別溶解，一起定容至1000ml。
3、1×SSC溶液：用10×SSC溶液稀釋10倍。
4、0.1×SSC溶液：用1×SSC溶液稀釋10倍。
5、Rnase溶液：用0.14mol/LNaCl溶液配制成25mg/ml的酶液，用1mol/LHCl，pH至5.0，使用前經(jīng)80℃水浴處理5min（以破壞可能存在的Dnase）。
6、氯仿－異戊醇：按24ml氯仿和1ml異戊醇混合。
7、5mol/L高氯酸鈉溶液：稱取NaClO₄·H₂O 70.23g，先加入少量蒸餾水溶解再容至100ml。
8、SDS（十二烷基硫酸鈉）化學(xué)試劑的重結(jié)晶：將SDS放入無水酒精中達到飽和為止，然后在70～80℃的水浴中溶解，趁熱過濾，冷卻之后即將濾液放入冰箱，待結(jié)晶出現(xiàn)再置室溫下涼干待用。
9、1mol/LHCl。
10、0.2mol/LNaOH。
11、二苯胺乙醛試劑：1.5g二苯胺溶于100ml冰醋酸中，添加1.5ml濃硫酸，裝入棕色瓶，貯存暗處，使用時加0.1ml乙醛液〔濃乙醛：H2O＝1：50（V／V）〕。
12、1.0mol/L高酸溶液（HClO₄）。
13、0.05mol/LNaOH。
14、DNA標準液：取標準DNA25mg溶于少量0.05mol.L-1NaOH中，再用0.05mol/LNaOH定容至25ml，后用移溶管吸取此液5ml至50ml容量瓶中，加5.0ml1mol/LHClO4，混合冷卻后用0.5mol/LHClO4定容至刻度，則得100μg/ml的標準溶液。

實驗步驟：
1、稱取植物幼嫩組織10g剪碎置研缽中，加10ml預(yù)冷研磨緩沖液并加入0.1g左右的SDS，置冰浴上研磨成糊狀。
2、將勻漿無損轉(zhuǎn)入25ml刻度試管中加入等體積的氯仿－異戊醇混合液，加上塞子，劇烈振蕩30s，轉(zhuǎn)入離心管，靜置片刻以脫除組織蛋白質(zhì)。以4000rpm離心5min。
3、離心形成三層，小心地吸取上層清液至刻度試管中，棄去中間層的細胞碎片、變性蛋白質(zhì)及下層的氯仿。
4、將試管置72℃水浴中保溫3min（不超過4min），以滅活組織的DNA酶，然后迅速取出試管置冰水浴中冷卻到室溫，加5mol/L高氯酸鈉溶液〔提取液：高氯酸鈉溶液＝4：1（V／V）〕，使溶液中高氯酸鈉的最終濃度為1mol/L。
5、再次加入等體積氯仿－異戊醇混合液至大試管中，振蕩1min，靜置后在室溫下離心（4000rpm）5min，取上清液置小燒杯中。
6、用滴管吸95％的預(yù)冷乙醇，慢慢地加入燒杯中上清液的表面上，直至乙醇的體積為上清液的兩倍，用玻璃棒輕輕攪動。此時核酸迅速以纖維狀沉淀纏繞在玻璃棒上。
7、然后加入0.5ml左右的10×SSC，使最終濃度為1×SSC。
8、重復(fù)第6步驟和第7步驟即得到DNA的粗制品。
9、加入已處理的Rnase溶液，使其最后的作用濃度為50～70μg/ml，并在37℃水浴中保溫30min，以除去RNA。
10、加入等體積的氯仿－異戊醇混合液，在三角瓶中振蕩1min，再除去殘留蛋白質(zhì)及所加Rnase蛋白，室溫下以4000rpm離心5min，收集上層水溶液。
11、再按6、7步驟處理即可得到純化的DNA液。

方法四：

改進的SDS法提取植物葉片基因組DNA

1、取指甲大小的植物葉片，置于研缽中，加入適量液氮，用研棒磨成粉未（越細越好）。

2、將粉末移入1.5 ml離心管，加入DNA提取洗滌液1.5 ml，輕輕顛倒混勻。

3、8000 rpm離心10 min，棄上清，加入洗滌液1 ml，混勻，8000 rpm離心10min，棄上清，共洗滌2遍。

4、加入預(yù)熱的DNA裂解液500 μL，用牙簽輕輕攪拌均勻，置65℃水浴30 min。

5、水浴后立即加入苯酚/氯仿/異戊醇500 μL，顛倒數(shù)次，這時溶液變?yōu)槿榘咨?/span>10000 rpm離心5min，取上清液至新的1.5ml離心管中。

6、加入55 μL醋酸鉀，顛倒混勻，10000 rpm離心10min，取上層清液轉(zhuǎn)移至新的1.5ml離心管中。

7、加入異丙醇300 μL，室溫30 min或-20℃放置2 hr，12000 rpm離心10min，棄上清，取沉淀，加入500μL70%乙醇，室溫放置2 min，12000 rpm離心5 min，棄上清，取沉淀。

8、加入30 μL含5 g/ml RNase 的TE緩沖液，37℃水浴放置1hr。

9、離心30 s后，取10 μL于0.8%瓊脂糖凝膠上進行電泳鑒定。

方法五：
植物DNA的CTAB提取法：
1、稱取新鮮葉片2-3g，剪碎放入研缽中，在液氮中研磨成粉末。
2、將粉末轉(zhuǎn)移到加有7ml經(jīng)預(yù)熱的15×CTAB提取緩沖液15ml離心管中，迅速混勻后置于65℃水浴中，溫育30min。
3、取出離心管,冷卻至室溫，加入氯仿/異戊醇(24:1)，充分混勻，室溫下2300轉(zhuǎn)離心20min。
4、將上清轉(zhuǎn)移至另一新的15ml離心管中，加入1/10體積10%的CTAB和等體積的氯仿/異戊醇。充分混勻，2300rpm離心20min。
5、轉(zhuǎn)移上清至另一新的15ml離心管中，加入等體積1%的CTAB沉淀緩沖液，輕輕搖晃至形成DNA絮狀沉淀。1000rpm離心10min，使DNA沉淀于管底。
6、加入1.5-2ml的1mol/LNaCl及5μlRNase置于56℃水浴中過夜。
7、待DNA完全溶解后，加2-3ml4℃預(yù)冷的95%的冰乙醇使DNA沉淀，挑出DNA，置于15ml離心管中，用70%乙醇清洗30min。
8、離心機甩5s，倒出70%乙醇，再用95%乙醇浸泡5min，倒出95%乙醇，在超凈工作臺上吹干。
9、將風(fēng)干的DNA直接在4℃保存?zhèn)溆没蛉苡?/span>100μlTE溶液中于-20℃保存。