中文English
1、快速微量提取法
1. 取1.5ml菌體培養(yǎng)物于一滅菌Ep管中，12000rpm離心1min， 丟去上清夜，收集菌體。
2. 加入400μl裂解液（40mMTris-醋酸，20mM醋酸鈉，1mMEDTA，1%SDS，pH7.8）混勻，置于37℃水浴1h。
3. 然后加入200 μl 5 mol/L的氯化鈉溶液，混勻后于13000rpm離心15min。
4. 取上清液，用苯酚抽提2次，氯仿抽提1次。
5. 加2倍體積無水乙醇，1/10體積醋酸鉀(3M ，pH8.0)，-20℃保存1小時后，13000rpm離心15min，棄上清液，沉淀用70%乙醇洗2次；置于室溫干燥后，溶于50μlTE溶液中，置4℃保存?zhèn)溆谩?/span>
2、加熱去蛋白法提取基因組DNA
試劑：
裂解液：10.95g蔗糖5ml 0.1 mmol/L MgCl2，2ml 0.5mmol/LTris·HCl （pH7.5），1ml TritonX-100，加滅菌雙蒸水至，100ml；提取液：10ml 0.5 mmol/L KCl， 2.5ml 0.1mol/L MgCl2，2ml 0.5mmol/LTris·HCl（pH8.3），0.45ml NP-40，0.45mlTween-20，加滅菌雙蒸水至100ml；蛋白酶K20mg/ml（貯存液）；TE緩沖液（pH8.0），0.2ml 0.5mmol/L EDTA （pH8.0），加水至100ml。
基因組DNA的提取
抗凝全血0.5ml加等量的裂解液，顛倒混勻后，4℃放置30min，離心3000rpm，10min，棄上清；用0.2ml提取液懸浮沉淀，加入10μl蛋白酶K（20mg/ml），顛倒混勻后，55℃水浴60min，沸水浴中保溫10min；離心12000rpm，20min 后，小心吸取上清’上清中加入2.5倍體積的冷無水乙醇，顛倒混勻后，-20℃靜置30min，離心12000rpm，20min，棄去水相；沉淀用75%冷乙醇洗滌2次，同上離心，10min，棄去上清；在超凈工作臺中空氣干燥10min，溶于20μl緩沖液中-20℃保存。
3、碘化鈉法（參照Loparev等法加以改良）提取基因組DNA
試劑
6mmol/L碘化鈉溶液：1.5g Na2SO3溶于80℃滅菌水中，加入90g NaI，溶解后定容至100ml；氯仿；異丙醇；TE緩沖液（pH8.0）
基因組DNA的提取
抗凝全血0.5ml加等量的無菌水0.5ml顛倒混勻；加6mmol/L NaI 1ml，渦旋震蕩30s；加等體積氯仿/異丙醇（24:：1）混勻；4℃。12000rpm 離心10min，小心吸取上清；加0.6倍體積異丙醇混勻；室溫（或4℃）靜置15min；4℃，12000rpm離心，10min，棄去上清；沉淀用37%異丙醇洗1次，在超凈工作臺干燥，溶于20μl TE緩沖液中，-20℃保存。
4、TT（TritonX-100和Tris-HCl等混合液的總稱）溶血法提取基因組DNA
試劑
裂解液：10.95g蔗糖5ml 0.1 mmol/L MgCl2，2ml0.5mmol/L Tris·HCl（pH7.5），1ml TritonX-100，加水至，100ml；提取液：10ml 0.5 mmol/L KCl， 2.5ml0.1mol/L MgCl2，2ml 0.5mmol/LTris·HCl（pH8.3），0.45mlNP-40，0.45ml Tween-20 ，加水至100ml；蛋白酶K 20mg/ml（貯存液）；Tris平衡液；氯仿；TE緩沖液（pH8.0）。
基因組DNA的提取
抗凝全血0.5ml加等量的裂解液，顛倒混勻后，4℃放置30min；離心3000rpm，10min，棄上清；用0.2ml提取液，10μl蛋白酶K儲存液懸浮沉淀，顛倒混勻后，55℃水浴66min；加等體積Tris平衡酚/氯仿（1：1）顛倒混勻后，離心12000rpm，10min；小心吸取上清，加入2.5倍體積的冷無水乙醇，顛倒混勻后，-20℃靜置30min；離心12000rpm，10min，棄去水相；沉淀用75%冷乙醇洗滌兩次，同上離心10min棄去上清；在超凈工作臺中空氣干燥10min，溶于20μl緩沖液中，-20℃保存。
5、氯化胺法提取基因組DNA
試劑
10×紅細胞裂解液：8.29h NH4Cl，1.0g KHCO3，0.037g EDTA，加水至100ml；白細胞裂解液：0.5ml 2mmol/L Tris（pH8.2），10ml 4mmol/L NaCl，0.4ml 0.5mmol/L EDTA，加水至100ml；10%（W/V）SDS；蛋白酶K20mg/ml（貯存液）Tris平衡酚；氯仿；TE緩沖液（pH8.0）
基因組DNA的提取
抗凝全血0.5ml加2倍的1×紅細胞裂解液，顛倒混勻后，冰上靜置30min直至溶液變透明；離心3000rpm，10min棄上清；加300μl白細胞裂解液，顛倒混勻，加30μl 10%（W/V），的SDS顛倒混勻；直到出現(xiàn)粘稠透明狀為止；加10μl蛋白酶K儲存液，顛倒混勻后，55℃水浴60min，加等體積Tris平衡酚/氯仿（1：1）顛倒混勻后，離心12000rpm，10min；小心吸取上清，加入2.5倍體積的冷無水乙醇，顛倒混勻后，-20℃靜置30min；離心12000rpm，10min，棄去水相；沉淀用75%冷乙醇洗滌兩次，同上離心10min，棄去上清；在超凈工作臺中空氣干燥10min，溶于20μl TE緩沖液中，-20℃保存。
