近來有用戶反映Simgen的2×SYBR Green PCR Mix（7106100）產(chǎn)品做PCR檢測，與某公司的SYBR Green Mix相比較，發(fā)現(xiàn)有CT值有增大的現(xiàn)象，這是為什么呢？

小編經(jīng)過深入研究，發(fā)現(xiàn)當(dāng)選用 2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ配合用戶的引物PCR檢測時(shí)，CT值就與某公司的SYBR Green Mix幾乎一致了。原來2×SYBR Green PCR Mix（7106100）是追求高特異性的產(chǎn)品；而2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ則是追求高靈敏度的產(chǎn)品--但是它對(duì)于引物的要求會(huì)比較高，如果引物設(shè)計(jì)得不好，在PCR的過程中，模板起始濃度較低時(shí)很容易出現(xiàn)非特異擴(kuò)增，下面就讓小編給大家介紹一下這兩款產(chǎn)品的優(yōu)點(diǎn)及不足：

下面是兩款產(chǎn)品實(shí)例測試： 

PCR體系配置

2×SYBR Green PCR Mix的標(biāo)準(zhǔn)曲線 
 
 從上圖所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的相關(guān)系數(shù)高達(dá)0.999，而且重復(fù)性高。

2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ（7107100）的標(biāo)準(zhǔn)曲線

從上圖所述，2×SYBR Green PCR MixⅡ在高濃度模板時(shí)，相關(guān)系數(shù)高達(dá)0.999，重復(fù)性高；但是引物設(shè)計(jì)不完美時(shí)，一旦有低模板濃度，就會(huì)出現(xiàn)非特異擴(kuò)增，從而降低相關(guān)系數(shù)。

CT值表

從CT值表格及融解曲線看，可看出2×SYBR Green PCR MixⅡ在靈敏度上比2×SYBR Green PCR Mix（7106100）會(huì)高出0.5-1個(gè)CT值左右，但是在低濃度模板時(shí)（10^-7），2×SYBR Green PCR MixⅡ的CT值出現(xiàn)異常，這是因?yàn)樵谝镌O(shè)計(jì)的不是很好時(shí)，2×SYBR Green PCR MixⅡ在低濃度模板時(shí)易出現(xiàn)非特異擴(kuò)增。  

綜上所述，2×SYBR Green PCR Mix（7106100）的特異性比2×SYBR Green PCR Mix Ⅱ高，但是在靈敏度上不如2×SYBR Green PCR MixⅡ。所以倘若追求高特異性，小編推薦使用2×SYBR Green PCR Mix（7106100），如果追求靈敏度，還是推薦使用2×SYBR Green PCR MixⅡ。

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