土壤，是由一層層厚度各異的礦物質(zhì)成分所組成大自然主體。土壤和母質(zhì)層的區(qū)別表現(xiàn)在于形態(tài)、物理特性、化學(xué)特性以及礦物學(xué)特性等方面。由于地殼、水蒸氣、大氣和生物圈的相互作用，土層有別于母質(zhì)層。它是礦物和有機物的混合組成部分，存在著固體，氣體和液體狀態(tài)。疏松土壤微粒組合起來，形成充滿間隙的土壤的形式。這些孔隙中含有溶解溶液（液體）和空氣（氣體），因此，土壤通常被視為有多種狀態(tài) 。

提取土壤中微生物、動植物遺體等的DNA是在分子水平上研究生態(tài)、環(huán)境保護(hù)與修復(fù)及菌種篩選等的基礎(chǔ)。土壤的成分包括礦物質(zhì)、粘土等無機物、植物及植物的遺體、腐殖物質(zhì)等土壤有機物以及在土壤中存在的微生物，其中絕大部分的微生物都是無法直接培養(yǎng)進(jìn)行繁殖和研究，從土壤樣品中提取DNA是研究土壤微生物最為有效的方法。

在整個提取的過程中，腐殖質(zhì)是最大的干擾因素。腐殖質(zhì)是已死的生物體在土壤中經(jīng)微生物分解而形成的有機物質(zhì)，含有植物生長發(fā)育所需要的一些元素，能改善土壤，增加肥力。主要方法是幫助增加可以讓空氣和水進(jìn)入的空隙，也同樣產(chǎn)生植物必須的氮，硫，鉀和磷。動植物殘體在微生物作用下形成簡單化合物的同時又重新合成復(fù)雜的高分子化合物。但是由于腐殖物質(zhì)的性質(zhì)與DNA十分相似，從土壤中提取的DNA的同時也會將將腐殖質(zhì)等物質(zhì)一起純化，因而采用一般的DNA提取方法很難除去腐殖物質(zhì)等抑制因子，再加上這些腐殖物質(zhì)會抑制聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)（PCR）及限制性酶切等，因此，徹底去除腐殖物質(zhì)等抑制因子是整個操作過程中的重點，也是難點。

DNA的方法主要有直接法和間接法。直接法是指將土壤樣品放在裂解液中，經(jīng)過有效的破壁方法使微生物的DNA全部釋放到裂解液中，然后再進(jìn)行分離提取的方法。間接法是指將土壤放在一種的緩沖液中，如Buffer PBS等，把微生物從土壤中分離出來，然后再進(jìn)行DNA的提取。間接法可大大降低土壤中腐殖酸，重金屬鹽對DNA提取帶來的影響，但是這種方法會丟失許多微生物，得到的DNA并非土壤樣品中的全基因組(宏基因組)，間接法使用的已經(jīng)很少了。

目前市面上對于去除腐殖質(zhì)工藝做的最好的試劑盒，就是MPbio公司的土壤DNA提取試劑盒，該試劑盒能夠有效去除土壤樣本中的腐殖質(zhì)，極大提高目標(biāo)DNA的提取濃度，很多土壤相關(guān)工作人員都選用該試劑盒。不過優(yōu)秀的產(chǎn)品也會有短板，MP試劑盒在有效去除腐殖質(zhì)的過程中難免會造成目標(biāo)DNA的損失，操作過程略顯繁瑣，同時作為一個進(jìn)口的產(chǎn)品，價格因素可以說是該產(chǎn)品最大的短板。   

杭州新景生物試劑開發(fā)有限公司作為新手福音，業(yè)界良心，經(jīng)過一系列的研究，終于開發(fā)了一種高效的去腐殖酸緩沖液，最大限度的去除土壤樣本中的腐殖質(zhì)，保留目標(biāo)DNA，結(jié)合硅膠柱純化的技術(shù)，得到高純度的土壤微生物DNA。

我們的操作方法和一般的提取土壤DNA試劑盒有所不同，先要進(jìn)行樣本的前處理，將土壤樣本經(jīng)過去腐緩沖液洗滌，然后進(jìn)行DNA提取得到高純度且不含腐殖酸的土壤DNA。我們可以將多達(dá)500 mg的土壤樣本放入含有陶瓷顆粒的2.0 ml試管中，首先使用去腐緩沖液洗滌，離心去上清后使用高效裂解液裂解所有土壤生物，包括之前難以裂解的種類，如真細(xì)菌孢子和芽孢、革蘭氏陽性菌、酵母、藻類、線蟲和真菌。離心后取上清與結(jié)合液結(jié)合，過硅膠柱進(jìn)行DNA純化即可得到高純度DNA。