產(chǎn)品介紹

T4 DNA Ligase(Fast)由攜帶T4噬菌體gene 30的大腸桿菌產(chǎn)生。該酶催化雙螺旋DNA或RNA之間的5'-磷酸基團(tuán)和3'-羥基之間形成磷酸二酯鍵。該酶在雙鏈DNA、RNA或者DNA/RNA 復(fù)合物間可修復(fù)單鏈缺刻，并且可以連接有粘性末端或者平末端的DNA片段，但對(duì)于單鏈核酸無(wú)活性，主要用于限制性內(nèi)切酶酶切產(chǎn)物DNA片段克隆、基因定點(diǎn)突變與PCR產(chǎn)物克隆、修復(fù)雙鏈DNA缺刻與線性DNA自環(huán)化。T4 DNA Ligase需要ATP作為輔助因子，在室溫下完成粘性末端連接反應(yīng)僅需10分鐘。

運(yùn)輸及保存

低溫運(yùn)輸、﹣20℃保存，有效期為兩年。

活性單位定義

37℃條件下，1 Weiss unit的酶在20分鐘內(nèi)催化1 nmol的[32PPi]轉(zhuǎn)變?yōu)榛钚蕴课綉B(tài)。1 Weiss unit等同于約200個(gè)粘性末端連接反應(yīng)單位（CEU），相當(dāng)于在16℃條件下，30分鐘內(nèi)連接50% Hind Ⅲ消化后的λDNA片段。