載體構(gòu)建是分子生物學(xué)研究常用的手段之一。主要包括已有載體多克隆位點(diǎn)MCS的改造和已有載體啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、篩選標(biāo)記等功能元件的改造。載體構(gòu)建完成后可利用PCR原理進(jìn)行測(cè)序驗(yàn)證。 但由于影響因素較多,對(duì)研究者經(jīng)驗(yàn)要求較高,因而往往費(fèi)時(shí)費(fèi)力。
本公司憑借長(zhǎng)期分子生物學(xué)工作的豐富經(jīng)驗(yàn),集中人力,為您提供更高效、快捷的載體構(gòu)建服務(wù)。根據(jù)已有的載體進(jìn)行改造方案的設(shè)計(jì),完成現(xiàn)有載體不同功能元件的改造;可應(yīng)客戶要求將指定片段亞克隆至各載體。
(2)目的DNA片段和載體鏈接
(3)鏈接產(chǎn)物的轉(zhuǎn)化
(4)克隆篩選。
1、服務(wù)范圍
(1)載體改造包括載體MCS改造;啟動(dòng)子、增強(qiáng)子、篩選標(biāo)志物等功能元件的改造;
(2)以PCR為基礎(chǔ)的各類載體構(gòu)建,包括細(xì)菌表達(dá)載體、酵母表達(dá)載體、桿狀病毒表達(dá)載體、哺乳動(dòng)物表達(dá)載體;報(bào)道基因載體構(gòu)建;
(3)基因突變,包括單點(diǎn)突變,多點(diǎn)突變,基因缺失等;
(4)SiRNA表達(dá)載體與miRNA表達(dá)載體構(gòu)建。
2、載體構(gòu)建和改造服務(wù)說(shuō)明
(1)客戶提供載體構(gòu)建及改造所需的實(shí)驗(yàn)方案,目的基因產(chǎn)物及序列(如果目的基因不好制備),載體及相關(guān)背景資料。
(2)若客戶只提供組織、細(xì)胞等樣本,還需提供目的基因NCBI登錄號(hào),本公司將額外收取RNA提取及逆轉(zhuǎn)錄費(fèi)用。
(3)對(duì)于表達(dá)載體、報(bào)告基因載體以及病毒載體等的構(gòu)建,您需要提供序列資料、希望克隆到的載體、酶切位點(diǎn)等資料;
3、實(shí)驗(yàn)服務(wù)周期及收費(fèi)標(biāo)準(zhǔn)
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4、實(shí)驗(yàn)服務(wù)報(bào)告內(nèi)容
(1)含目的片段的質(zhì)粒、含該質(zhì)粒的細(xì)菌各一份;
(2)引物序列、載體圖譜、測(cè)序結(jié)果各一份;
(3)載體構(gòu)建技術(shù)服務(wù)所需試劑耗材、儀器設(shè)備、操作過(guò)程一份;
(4)對(duì)于基因片段克隆,由于是您提供的基因片段,我們只能保證酶切的正確。
5、載體構(gòu)建服務(wù)承諾
如涉及PCR,在客戶保證提供的模板正確的前提下,本公司保證PCR擴(kuò)增的基因或功能元件片段無(wú)移碼突變,堿基序列正確率在100%以上。