可能的原因:
1、制作的凝膠從加樣孔至DNA泳動(dòng)方向呈現(xiàn)為一個(gè)降低的斜面,DNA在泳動(dòng)的過程中大量地流失到電泳緩沖液中。制作瓊脂糖凝膠時(shí)應(yīng)注意放平制膠槽,并加入足夠量的凝膠液。
2、凝膠沒有完全被溶解,DNA仍保留在未溶解的凝膠中。在50°C溶膠時(shí)每隔2-3分鐘請(qǐng)將離心管漩渦振蕩數(shù)秒以幫助凝膠徹底溶解。
3、在凝膠溶解后的溶液中加入異丙醇出現(xiàn)霧狀沉淀。出現(xiàn)該種現(xiàn)象主要是因?yàn)槟z沒有被徹底溶解,此時(shí)應(yīng)注意不要省略后續(xù)的Bufffer G的洗滌步驟,并且加入BufferG到純化柱中后室溫靜置1分鐘,以增強(qiáng)對(duì)未溶解的凝膠的洗滌效果。