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培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒實(shí)驗(yàn)案例

作者:新景實(shí)驗(yàn)室
版權(quán)說(shuō)明:本文系原創(chuàng)文章 轉(zhuǎn)載請(qǐng)標(biāo)注出處和本文鏈接

一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>

檢測(cè)Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取不同培養(yǎng)細(xì)胞中的RNA的效果。

二、實(shí)驗(yàn)步驟:

使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒分別提取 HL-60、HEK239、 K562、 

SGC-7901等細(xì)胞的RNA(具體實(shí)驗(yàn)步驟詳見說(shuō)明書)。

三、實(shí)驗(yàn)樣本:

2×106HL-60細(xì)胞、2×106HEK239細(xì)胞、2×106 K562細(xì)胞、2×106 SGC-7901細(xì)胞。

四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:

1.使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的上述各細(xì)胞中的RNA電泳圖:

 

Mλ-EcoT14 I digest
泳道1:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106  HL-60細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道2:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 HEK239細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道3:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 K562細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道4:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106  SGC-7901細(xì)胞中分離純化的RNA

2.使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的上述各細(xì)胞中的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄后,再擴(kuò)增的曲線圖:

 

Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒HL-60、HEK239、 K562 SGC-7901(分別是1-4中提取的RNA,經(jīng)Simgen cDNA第一鏈合成試劑盒處理后,用Human β-actin引物進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增的曲線。

五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:

1. 根據(jù)上圖電泳圖可知,使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的培養(yǎng)細(xì)胞的RNA,條帶清晰明顯。

2.根據(jù)擴(kuò)增曲線圖可知,提取的各細(xì)胞RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后成功擴(kuò)增出曲線,證明Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的RNA能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。