一、實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?/strong>
檢測(cè)Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取不同培養(yǎng)細(xì)胞中的RNA的效果。
二、實(shí)驗(yàn)步驟:
使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒分別提取 HL-60、HEK239、 K562、
SGC-7901等細(xì)胞的RNA(具體實(shí)驗(yàn)步驟詳見說(shuō)明書)。
三、實(shí)驗(yàn)樣本:
2×106HL-60細(xì)胞、2×106HEK239細(xì)胞、2×106 K562細(xì)胞、2×106 SGC-7901細(xì)胞。
四、實(shí)驗(yàn)結(jié)果:
1.使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的上述各細(xì)胞中的RNA電泳圖:
M:λ-EcoT14 I digest
泳道1:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 HL-60細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道2:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 HEK239細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道3:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 K562細(xì)胞中分離純化的RNA
泳道4:用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從2×106 SGC-7901細(xì)胞中分離純化的RNA
2.使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的上述各細(xì)胞中的RNA進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄后,再擴(kuò)增的曲線圖:
用Simgen培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒從HL-60、HEK239、 K562、 SGC-7901(分別是1-4)中提取的RNA,經(jīng)Simgen cDNA第一鏈合成試劑盒處理后,用Human β-actin引物進(jìn)行熒光定量PCR擴(kuò)增的曲線。
五、實(shí)驗(yàn)結(jié)論:
1. 根據(jù)上圖電泳圖可知,使用Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的培養(yǎng)細(xì)胞的RNA,條帶清晰明顯。
2.根據(jù)擴(kuò)增曲線圖可知,提取的各細(xì)胞RNA經(jīng)反轉(zhuǎn)錄后成功擴(kuò)增出曲線,證明Simgen 培養(yǎng)細(xì)胞總RNA試劑盒提取的RNA能夠滿足后續(xù)實(shí)驗(yàn)需求。