1.如果直接將血細(xì)胞凍存于-80℃,再取出后進(jìn)行RNA提取是否可以?
2.如果用普通Trizol法,是等血細(xì)胞融化后再加Trizol還是在血細(xì)胞冰凍狀態(tài)下直接加Trizol呢?
3.另外,冰凍的血細(xì)胞融化后(取血時(shí)使用的是抗凝管)發(fā)現(xiàn)有很多血凝塊,這種情況是否正常?
1.直接將血細(xì)胞凍存提RNA不能使用simgen全血總RNA試劑盒。
2.若采用trizol法提取,在血細(xì)胞冰凍下或者溶解后加trizol都可以。
3.冰凍的血細(xì)胞溶解后發(fā)現(xiàn)血凝塊,可能是細(xì)胞破裂,基因組DNA黏在一起的原因。出現(xiàn)血凝塊這種情況,后期提取RNA相對(duì)困難,trizol較難使其溶解。
這邊建議,冷凍前采用全血冷凍,后續(xù)實(shí)驗(yàn)可以采用simgen全血總RNA試劑盒,可輕松獲得全血RNA。