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產(chǎn)品簡(jiǎn)介
pUC-19 載體是小分子量、高拷貝的大腸桿菌質(zhì)粒,長(zhǎng)度均為2,686 bp。pUC-19 質(zhì)粒含有:(1)pMB1 復(fù)制子rep,主管質(zhì)粒復(fù)制(來(lái)源pBR322 質(zhì)粒)。rop基因缺失和pMB1的復(fù)制 子rep 的單點(diǎn)突變是pUC 質(zhì)粒高拷貝的原因;(2)bla基因:編碼β-內(nèi)酰胺酶,對(duì)氨芐青霉素有抗性(來(lái)源—pBR322 質(zhì)粒)。該基因有兩個(gè)突變,與pBR322 的bla基因不同;(3)大腸桿菌lac 操縱子區(qū)域含有CAP 蛋白結(jié)合位點(diǎn)、啟動(dòng)子Plac、lac 抑制子結(jié)合位點(diǎn)和lacZ基因的5’-端部分(編碼β-半乳糖苷酶N-部分(來(lái)源—-M13mp18/19))。該片段(合成受IPTG誘導(dǎo))可與宿主(突變子△(lacZ)M15)編碼 的β-半乳糖苷酶缺陷型等位基因內(nèi)α互補(bǔ),從而在含有IPTG 和X-GAL的培養(yǎng)中形成藍(lán)色克隆。外源DNA 插入lacZ 基因內(nèi)部的MCS (lacZ 的密碼子6-7 被MCS替代)會(huì)使β-半乳糖苷酶的N-端片段失活從而消除α-互補(bǔ)效應(yīng)。因此,含有重組質(zhì)粒的大腸桿菌在培養(yǎng)基中產(chǎn)生白色克隆。
運(yùn)輸及保存
低溫運(yùn)輸、-20℃保存,有效期大于兩年。
pUC-19質(zhì)粒的結(jié)構(gòu)