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產(chǎn)品特點(diǎn)
1、核酸可在高鹽條件下結(jié)合到核酸純化柱上,并可在低鹽條件下用水或者TE洗脫。
2、核酸純化柱無需平衡液平衡,可直接使用。
3、核酸純化柱可配合Simgen公司的核酸純化試劑或者Qiagen公司的核酸純化試劑使用。
4、核酸純化柱核酸飽和吸附能力定義(對(duì)質(zhì)粒純化試劑盒較有意義):含有核酸的高鹽溶液加入核酸純化柱后,在未飽和時(shí),核酸被純化柱100%吸附。當(dāng)濾液中能檢測(cè)到核酸時(shí),純化柱上吸附的核酸量是純化柱的飽和吸附量。當(dāng)繼續(xù)向核酸純化柱中加含有核酸的高鹽溶液時(shí),純化柱仍能繼續(xù)吸附部分核酸,但僅能吸附溶液中30%的核酸或者更少。
5、 國產(chǎn)膜與進(jìn)口膜差異測(cè)試方法:質(zhì)粒純化時(shí)在離心上清中如果質(zhì)粒DNA的含量較少,比如10μg時(shí),選用國產(chǎn)膜或者進(jìn)口膜柱子差異不太明顯。因此在測(cè)試柱子的差異時(shí)需確保在高鹽溶液中有足夠量的質(zhì)粒DNA加入純化柱中:
1)每管收集6-8毫升LB培養(yǎng)物中的細(xì)菌(即如果細(xì)菌中質(zhì)粒DNA含量為5μg/ml,確保離心上清中含有30-40μg質(zhì)粒DNA)用作質(zhì)粒DNA純化,共收集4管細(xì)菌。
2)操作至離心取上清步驟,將上清液混合到一起后再平均分配到4個(gè)純化柱中(注意,必須要混合后再分開,才能精確評(píng)估柱子的差異),最后用相同的洗脫體積洗脫DNA,測(cè)試兩種柱子上洗脫的質(zhì)粒DNA的質(zhì)量。
3)Simgen純化柱檢測(cè)獲得過的數(shù)據(jù):進(jìn)口膜的柱子的飽和結(jié)合能力在20-30 μg之間,國產(chǎn)膜的柱子的飽和結(jié)合能力在15-20 μg之間,供以參考。
6、純化柱的加速穩(wěn)定性測(cè)試方法:將純化柱放入烘箱 45℃2-4個(gè)星期,與室溫放置的純化柱比較DNA的飽和吸附能力。在烘箱 45℃放置2-4個(gè)星期,相當(dāng)于室溫放置1-2年的放置時(shí)間。大多數(shù)國產(chǎn)純化柱45℃放置4個(gè)星期后純化柱的DNA吸附率降低一半以上。